Фарбування по Граму або також відомий як кольорова Gram цієї назви для типу диференціального фарбування використовуються в області бактеріології, щоб візуалізувати бактерії, особливо в клінічних зразках. Назва цього забарвлення обумовлена датським бактеріологом Крістіаном Грамом, який відповідав за розробку методики в 1884 році. Головною метою Грама було отримання тесту, який дозволив би йому диференціювати різні групи бактерій з метою їх вивчення та розробки їх класифікація. Експерименти Грана виявилися дуже успішними, і він швидко утвердився як одна з головних технік використовується для вивчення бактерій, оскільки це дозволило швидко та ефективно їх ідентифікувати в інфекції та вибрати антибіотик, який найбільш підходить для лікування зазначеної інфекції.
Процедура проведення фарбування полягає в наступному: перше, що потрібно взяти зразок бактерій для фарбування, потім тампоном його потрібно розподілити на предметне скло, а потім залишити сохнути при кімнатній температурі або, якщо цього не вдасться, використовувати запальничку, особливо обережно, щоб не спалити бактерії. Після цього зразок слід закріпити на предметному склі за допомогою метанолу приблизно на 1 хвилину.
Згодом поміщає відтінок з фіолетовим тирличу на слайді і витримати в протягом 1 хвилини. Важливо, що цей барвник має здатність долати будь-який тип бактеріальної стінки, і саме тому може фарбувати як бактерії, як грампозитивні, так і негативні. Після цього зразок слід промити водою, а потім додати Люголя, щоб зазначена речовина покрила весь зразок і почекати одну хвилину. Люголь - це сполука, яка в основному складається з йоду, який у цьому випадку відповідає за фіксацію фіолетового барвника тирличу до зразка.
Після описаних вище етапів предметне скло потрібно промивати сумішшю спирту та ацетону протягом приблизно 30 днів, саме на цьому етапі, коли пляма по Граму дійсно закінчується, це пов’язано з тим, що суміш спирту та ацетону відповідає за розчинення комплексів люголю та тирлич фіолетового.
